3/1:20421
2.4.21. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОСТОРОННИХ МАСЕЛ В ЖИРНЫХ МАСЛАХ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Испытание проводят методом тонкослойной хроматографии (2.2.27).
Приготовление смеси жирных кислот. К 2 г масла прибавляют 30 мл 0.5 M раствора
калия гидроксида спиртового и нагревают с обратным холодильником в течение 45 мин.
Добавляют 50 мл воды Р, охлаждают, переносят в делительную воронку и экстрагируют
тремя порциями эфира Р по 50 мл. Эфирные слои отбрасывают, водный слой подкисляют
хлороводородной кислотой P и вновь встряхивают с тремя порциями эфира Р по 50 мл.
Эфирные экстракты объединяют и встряхивают с тремя порциями воды Р по 10 мл,
отбрасывая промывные воды. Объединенные эфирные экстракты сушат над натрия
сульфатом безводным P и фильтруют. Затем эфир выпаривают на водяной бане, а из
полученного остатка готовят испытуемый раствор. Жирные кислоты также можно извлечь
из раствора, полученного в ходе определения неомыляемых веществ.
Испытуемый раствор. 40 мг смеси жирных кислот, полученной из испытуемого образца,
растворяют в 4 мл хлороформа Р.
Раствор сравнения. 40 мг смеси жирных кислот, полученной из смеси, содержащей 19
объемов кукурузного масла P и 1 объем рапсового масла Р, растворяют в 4 мл хлороформа
Р.
Условия хроматографирования:
– ТСХ пластинка: покрытая слоем кизельгура G Р;
– подготовка ТСХ пластинки: пластинку пропитывают, поместив в камеру, содержащую
смесь парафин жидкий P – петролейный эфир P (10:90, об/об) в таком количестве, чтобы
нижний край пластинки был погружен на 5 мм ниже поверхности жидкости. Когда смесь
для пропитывания поднимется не менее чем на 12 см от нижнего края пластинки, ее
вынимают из камеры и дают растворителю испариться в течение 5 мин. Последующее
хроматографирование проводят в том же направлении, что и подготовка пластинки к
испытанию;
– подвижная фаза: вода Р – уксусная кислота ледяная Р (10:90 об/об);
– наносимый объем пробы: по 3 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения;
– пробег фронта подвижной фазы: 8 см;
– высушивание: при температуре 110 °C в течение 10 мин и оставляют до охлаждения;
– детектирование: при отсутствии других указаний в частной монографии пластинку
помещают в закрытую плотно подогнанной крышкой хроматографическую камеру,
предварительно насыщенную парами йода (на дно камеры в выпарительной чашке
помещают йод P).
Через некоторое время проявляются коричневые или желтовато-коричневые пятна.
Пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут. Когда коричневый фон
исчезнет пластинку опрыскивают раствором крахмала Р. Появляющиеся синие пятна при
высушивании могут приобретать коричневую окраску и вновь становятся синими после
опрыскивания водой Р.
На хроматограмме испытуемого раствора всегда должны обнаруживаться пятно с R
F
около 0.5 (олеиновая кислота) и пятно с R
F
около 0.65 (линолевая кислота),
соответствующие пятнам на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограммах
испытуемого раствора некоторых масел может обнаруживаться пятно с R
F
около 0.75
(линоленовая кислота).
При сравнении пятен на хроматограммах испытуемого раствора и раствора сравнения на
хроматограмме испытуемого раствора не должно обнаруживаться пятно с R
F
около 0.25
(эруковая кислота).
